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① 消化過度：

在消化過程中縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度，鏡下觀察細(xì)胞剝離的狀態(tài)，及時終止消化。

② 支原體污染：  

取培養(yǎng)24小時的培養(yǎng)基，檢測支原體。清潔培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染，丟棄培養(yǎng)物。

③ 培養(yǎng)基pH值過堿（NaHCO₃分解）：

可以使用無菌醋酸溶液調(diào)整pH值或充入無菌CO₂來調(diào)整培養(yǎng)液的PH值。

④ 細(xì)胞老化：

建議復(fù)蘇新的保種細(xì)胞，一般細(xì)胞老化的細(xì)胞會持續(xù)出現(xiàn)較嚴(yán)重的形態(tài)變化或者凋亡的情況。

⑥ 接種細(xì)胞起始濃度太低或太高 。

建議調(diào)節(jié)最佳接種細(xì)胞濃度。當(dāng)細(xì)胞濃度太高則貼壁位置不夠，細(xì)胞濃度太低則勢單力薄，培養(yǎng)基的輕微晃動就可能使其脫落。

① 為什么培養(yǎng)基顏色會有不同深淺：

不同品類的培養(yǎng)基中的酚紅指示劑添加含量也是不相同的，所以客戶會看到不同種類的培養(yǎng)基會有不同顏色；一般顏色的深淺為DMEM＞MEM＞DMEM/F12＞RPMI1640＞F12。

② 培養(yǎng)基在冰箱中為什么顏色會變深：

因?yàn)樵诳諝庵蠧O2濃度低，而培養(yǎng)基內(nèi)CO2則會逐漸溢出，HCO3-減少，就會造成培養(yǎng)基偏堿，液體顏色變深。

③ 培養(yǎng)基中含有谷氨酰胺的保存條件：

谷氨酰胺對溫度比較敏感，溫度越高的話降解速度越快。并且谷氨酰胺在溶液中不穩(wěn)定，一般應(yīng)置于-20℃冰箱中保存。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基應(yīng)存放在2℃–8℃溫度中保存。

④ DPBS和PBS有什么區(qū)別：

這兩者都屬于磷酸鹽緩沖液，成分上只有一點(diǎn)點(diǎn)磷酸鹽的含量差異，均有等滲和調(diào)節(jié)pH的功能，大多數(shù)對于細(xì)胞的使用上可以通用。

⑤ HBSS和PBS/DPBS有什么區(qū)別：

HBSS緩沖液中鹽成分較PBS和DPBS更復(fù)雜，且含有葡萄糖，可為細(xì)胞提供簡單的營養(yǎng)，而PBS/DPBS不能提供營養(yǎng)。